Исключительные преимущества ультрачувствительного ИФА с циклом тио-NAD в определении белка NS1 при денге
1. Введение
Лихорадка денге — это острое инфекционное заболевание, вызванное Вирус денге через укус инфицированного вида Aedes (Ae. aegypti или Ae. albopictus) комара, с основными симптомами, такими как высокая температура, головокружение, головная боль, сыпь и Тяжёлая боли (в глазах, мышцах, суставах или костях) и т.д. Это заболевание широко распространено в тропическом и субтропическом климате. По оценкам, ежегодно от 100 до 400 миллионов человек заражаются, из которых более 80% обычно имеют лёгкую форму и бессимптомные. Тем не менее, тяжёлая форма лихорадки Денге может повысить риск смерти при неправильном лечении. Таким образом, ранняя диагностика этого заболевания имеет большое значение для своевременного лечения.Примечательно, что неструктурный белок 1 (NS1), высококонсервативный гликопротеин, в основном выделяется во время инфекции Денге вирус, который интенсивно считается основным фактором патогенеза Лихорадка денге. Поэтому NSI обычно используется как биомаркер для раннего выявления этого заболевания.
In thявляется study, a sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ЭЛИЗА) в сочетании с Тионикотинамид аденин динуклеотид (THIO-NAD/S-NAD) Циклический метод (далее — ультрачувствительная ИФА) используется для обнаружения NSI, после чего проводится сравнение с NAAT для подтверждения точности обнаружения.
2. Преимущества и недостатки традиционных методов обнаружения для Лихорадка денге
В настоящее время tВот четыре основных метода обнаружения для Лихорадка денге.
Вирусная изоляция и идентификация обладают высокой специфичностью, но занимают много времени и занимают не менее 5 дней. The Быстрый антиген Тест самый быстрый и экономичный среди других методов, но чувствительность а специфичность относительно низкая. Серологический тест на основе IgM и IgG ограничен количество дней заражения, как The Тест должен быть отложен до повышения уровня антител поднимается до уловимого уровня.
В клинической практике часто применяется NAAT для определения Лихорадка денге грязью своей высокой чувствительностью и специфичностью. Однако этот метод дорогой, трудоёмкий и склонен к ложному позитиву, который должен выполнять обученный персонал. Чтобы преодолеть недостатки этих методов, был разработан новый метод обнаружения сверхчувствительный ИФА — это Применили в этом исследовании.
3. Рабочий процесс ультрачувствительной ИФА с циклированием тио-NAD
Пара антител является используется для захвата белка NS1 в сэндвиче ЭЛИЗА и щелочной фосфатазе является labeled on The secondary antibody. Aside from The antibodies, an androsterone derivative, 3α-hydroxysteroid dehydrogenase, thio-NAD, and NADH являются используется для создания системы циклирования ферментов тио-NAD. Во время циклической реакции тио-NAD тио-NADH постоянно накапливался треугольным числом и мог быть напрямую измерен при поглощении 405 нм.
4. Сравнение ультрачувствительного ИФА и NAAT при обнаружении белка NS1 при денге
В NAAT 60 образцов положительны к денге, а 25 — отрицательные. Порог циклического цикла NAAT (CT) у этих образцов с положительным на денге варьировался от 12,42 до 31,41. В ультрачувствительном ЭЛИЗА 59 образцов соответственно положительны к результатам NAAT, тогда как 25 образцов полностью отрицательны к результатам NAAT.По сравнению с NAAT, чувствительность и специфичность ультрачувствительного ИФА составляют соответственно 98,3% и 100% (Таблица 2). Из 60 подтверждённых NAAT образцов пациентов, положительных на денге, только один образец отрицательный в ультрачувствительном ИФЗ. Данные NAAT показали, что образец относится к инфекции DENV типа 4 с КТ 21,59. Результаты ультрачувствительного ИФА почти полностью совпадают с результатами NAAT, при этом значение каппа составляет 0,972 (95% ДИ: 0,917).-1.0).
5. Заключение
UМетод ltrasensitive ЭЛИЗА прост в выполнении и не требует профессиональных стажёров для работы. TОбнаружение может быть начато сразу после получения небольшого образца. Он особенно подходит для раннего обнаружения Денге болезнь в Страны с низким уровнем дохода.Ссылка
Chen, Po-Kai et al. “Advanced Detection Method для Денге NS1 Protein Using Ultrasensitive ЭЛИЗА with Thio-NAD Cycling.” Viruses vol. 15,9 1894. 8 Sep. 2023, doi:10.3390/v15091894Преимущества и особенности продукта BONTAC Thio-NAD/S-NAD
BONTAC является oОдно из немногих предприятий в Китай которая может производить Thio-NAD, с “Bonzyme” Цельный ферментатический метод (Экологически чистая; Нет вредных остатков растворителя) и unique “Bonpure” seven-step purification technology. BONTAC intergrates R&D, production and sale, с собственные заводы и ряд международных сертификатов для обеспечения высокого качества и стабильного поставки продукции.
