Научный метод количественной оценки NMN в биологических образцах
1. Введение
Дополнение кникотинамидмонуклеотид (NMN)для повышения регулированияуровень изникотинамид аденин динуклеотид (NAD+)было представлено как многообещающее антивозрастное вмешательство. Тем не менее, это всё равно серьёзный вызов точностиколичественно определять промежуточные NAD+, NMN в частности. Данное исследование позволяет представить новый метод — методологию двойного изотопного опосредованного LC-MS/MS (DIMELC-MS/MS) — для точной количественной оценкиNMN В биологических образцах.2. Факторы, влияющие на точное обнаружение NMN
NMN трудно точно обнаружить из-за уязвимости к ферментамдеградация, преобразование при обработке образцов, его сложное поведение в различных столбцовых и условиях извлечения, а также эффект матрицы.
В частности, NMN обладает свойствами высокой полярности и низкой летучесть — его легко растворить в воде, но трудно растворить в органических растворителях. Эти свойства значительно ограничивают применение многих традиционных методов количественного анализа.
BИологические образцынапример, кровь несёт значительную активность CD38 и CD73 (экто-5’-нуклеотидаза), обе из которых могут использовать NMN в качестве субстрата.
Поведение NMN в колонне очень сложное, вероятно, из-за бипартитного характера зарядов, поэтому тонкие различия в условиях экстракции и столбца существенно влияют на надёжное и точное обнаружение NMN.
3. Стратегии преодоленияdimeLC-MS/MS для снижения влияния импакт-факторов
Чтобы избежать помех вышеупомянутых факторов, pРототипКолонкаNMN-2 применяется. Эта колонкасодержатьs Частицы кремнезёма на основе C18 высокой чистоты которые способны связываться с гидрофильными соединениями, чем с углеродными частицами, что улучшает способность к разделению.PСоляная кислота (PCA) используется, так как может эффективно извлекать NAD+ и NMN из биологических образцов, таких как плазма, с минимальным содержанием Потери.
Для корректировки эффектов матрицы,a фиксированное количество (1 мкм) каждого Изотопное соединениеis добавлено вБиологические образцы до экстракции PCA.
4. Преимуществоs dimeLC-MS/MS
DСтандарты NMN изотопного оубла, NMN (M + 14) и NMN (M + 5) в методологии LC-MS/MS могут точно проследить судьбу NMN в процессе обработки образцов, которыйзначительно повышает точность и надёжность измерений NMN в биологических образцах. Кроме того, dimeLC-MS/MS может оценивать эффективность экстракции и абсолютные концентрации NMN в различных типах биологических образцов.
5. Заключение
Thявляется новый LC-MS/MS-методология, управляемая с двойными изотопными стандартами NMN может accuraТели и Reliably измерять NMN в биологических образцах. Её можно использовать для будущих исследований поступления NMN.6. Ссылка
Унно, Джуня и др. «Абсолютная количественная оценка никотинамидного мононуклеотида в биологических образцах с помощью двойной изотопно-опосредованной жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии (dimeLC-MS/MS).» npj Aging vol. 10,1 2. 2 января 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1Зачем выбиратьBONTAC?
BONTACявляется лидером глобальногоNMNпромышленность. У нас есть первая в Китае технология катализа цельного фермента, и мы стали ведущим предприятием в коферментные продукты, широко используемые в здравоохранении, медицине и красоте, зелёное сельское хозяйство, биомедицина и другие области. В частности,BONTAC — это NMNпоставщик сырья известной команды Дэвида Синклера в Гарвардском университете. Наши услуги и продукты заслуживают доверия. Кроме того,BONTACимеетнезависимыйкоэнзим Центр исследований инженерных технологий на провинциальном уровне в Китае и собственные фабрики, где обеспечивается чистота и стабильность продукции.
