Выдающиеся достоинства сверхчувствительного ИФА с циклированием тио-НАД в определении белка NS1 денге

1. Введение

Лихорадка денге является острым инфекционным заболеванием, вызываемым Вирус денгечерез укус инфицированного комара вида Aedes (Ae. aegypti или Ae. albopictus), с такими основными симптомами, как высокая температура, головокружение, головная боль, сыпь и Сильнаяболи (боль в глазах, мышцах, суставах или костях) и т.д. Это заболевание широко распространено в тропическом и субтропическом климате. По оценкам, ежегодно заражаются от 100 до 400 миллионов человек, из которых более 80% обычно протекают в легкой форме и протекают бессимптомно. Тем не менее, тяжелая лихорадка денге может увеличить риск смерти при отсутствии надлежащего лечения. Таким образом, ранняя диагностика данного заболевания имеет важное значение для его своевременного лечения.

Следует отметить, что неструктурный белок 1 (NS1), высококонсервативный гликопротеин, в основном секретируется во время инфекции Тропическая лихорадка вирус, который интенсивно рассматривается как основной фактор патогенеза Лихорадка денге. Следовательно, NSI обычно используется в качестве биомаркера для раннего выявления этого заболевания.

В данном исследовании был проведен иммуноферментный анализ сэндвича(ЭЛИЗА)в сочетании с тио никотинамидадениндинуклеотид (тио-NAD/S-NAD) Метод езды на велосипеде (в дальнейшем именуемый сверхчувствительным ИФА) используется для обнаружения НСИ с последующим сравнением с NAAT для подтверждения точности его обнаружения.

2. Преимущества и недостатки традиционных методов обнаружения для Лихорадка денге 

В настоящее время tВот четыре основных метода обнаружения для Лихорадка денге.


Выделение и идентификация вируса обладают высокой специфичностью, но занимают много времени и занимают не менее 5 дней. Экспресс-тест на антиген является самым быстрым и экономичным среди других методов, но его чувствительность и специфичность относительно низкие. Серологический тест на основе IgM и IgG ограничен количеством дней инфекции, так как тем Тест должен быть отложен до тех пор, пока уровень антител не поднимется до определяемого уровня.

В клинике NAAT часто применяется для определения Лихорадка денгезагрязнениями своей высокой чувствительности и специфичности. Однако этот метод является дорогостоящим, трудоемким и подвержен ложным положительным результатам, которые должны проводиться обученным персоналом. Для преодоления недостатков этих методов разработан новый метод обнаружения сверхчувствительный ИФА Применено в данном исследовании.

3. Рабочий процесс сверхчувствительного ИФА с циклированием тио-NAD

Пара антител естьиспользуется для захвата белка NS1 в сэндвиче ИФА и щелочной фосфатазы естьмеченый на вторичном антителе. Помимо антител, производное андростерона, 3α-гидроксистероиддегидрогеназа, тио-НАД и НАДН ариспользуется для создания системы цикла ферментов тио-NAD. Во время циклической реакции тио-NAD тио-NADH постоянно накапливался в треугольном числовом виде и мог быть непосредственно измерен при поглощении 405 нм.

4. Сравнение сверхчувствительных ИФА и NAAT в выявлении белка Денге NS1

В NAAT 60 образцов являются положительными на денге, а 25 – на денге-отрицательными. Пороговое значение циклического порога (СТ) NAAT у этих образцов с положительным результатом на денге варьировалось от 12,42 до 31,41. При сверхчувствительном ИФА 59 образцов соответственно положительно относятся к результатам NAAT, в то время как 25 образцов полностью отрицательно относятся к результатам NAAT.

По сравнению с NAAT чувствительность и специфичность ультрачувствительного ИФА составляют 98,3% и 100% соответственно (табл. 2). Из 60 подтвержденных NAAT образцов с положительным результатом теста на денге только 1 образец является отрицательным при сверхчувствительном ИФА. Данные NAAT показали, что образец относится к пациенту с инфекцией DENV 4 типа со значением КТ 21,59. Результаты сверхчувствительного ИФА почти полностью согласуются с результатами NAAT, со значением каппа 0,972 (95% ДИ: 0,917-1.0).

5. Заключение

Сверхчувствительный метод ИФА прост в выполнении и не требует профессиональных стажеров для работы. Обнаружение может быть начато сразу после получения небольшого образца. Он особенно подходит для раннего выявления болезни денге в странах с низким уровнем дохода.

Ссылка

Чен, По-Кай и др. «Усовершенствованный метод обнаружения белка NS1 денге с использованием сверхчувствительного ИФА с циклированием тио-НАД». Вирусы т. 15,9 1894. 8 сентября 2023 г., doi:10.3390/v15091894

Преимущества и особенности продукта BONTAC Thio-NAD/S-NAD

БОНТАК является oодно из немногих предприятий в Китайкоторые могут производить Тио-НАДс "Бонзим"Цельноферментативный метод(экологичность;Отсутствие вредных остатков растворителей) и уникальная семиступенчатая технология очистки "Bonpure". BONTAC объединяет НИОКР, производство и продажу с собственные заводы и ряд международных сертификатов для обеспечения высокого качества и стабильных поставок продукции.

Отказ

BONTAC не несет ответственности за любые претензии, возникающие прямо или косвенно в связи с вашим доверием к информации и материалам на этом веб-сайте.