Научный метод количественного определения NMN в биологических образцах
1. Введение
Добавки никотинамидмононуклеотид (НМН) для повышения уровня никотинамидадениндинуклеотида (НАД+) было объявлено многообещающим средством борьбы со старением. Тем не менее, точное количественное определение промежуточных продуктов НАД+ по-прежнему является серьезной проблемой. НМН в частности. Данное исследование направлено на внедрение нового метода, двухизотопно-опосредованной методологии ЖХ-МС/МС (DIMELC-MS/MS), для точной количественной оценки НМН в биологических образцах.
2. Факторы, влияющие на точное обнаружение NMN
NMN трудно точно обнаружить из-за его уязвимости к ферментативной деградации, конверсии при обработке образцов, его сложного поведения в различных условиях колонки и экстракции, а также из-за матричного эффекта.
В частности, NMN обладает свойствами высокой полярности и низкой летучести, которые легко растворяются в воде, но с трудом растворяются в органических растворителях. Эти свойства сильно ограничивают применение многих традиционных методов количественного анализа.
Bиологические образцы каккровь несет значительную активность CD38 и CD73 (экто-5)’-нуклеотидаза), оба из которых могут использовать NMN в качестве субстрата.
Поведение NMN в колонне очень сложное, вероятно, из-за двудольного характера его зарядов, так что тонкие различия в экстракции и условиях колонны существенно влияют на надежное и точное обнаружение NMN.
3. Копинг-стратегии dimeLC-MS/MSдля снижения влияния импакт-факторов
Во избежание интерференции вышеуказанных факторов применяется опытный образец колонны НМН-2. Эта колонка содержит частицы кремнезема высокой чистоты на основе C18, которые более способны связывать гидрофильные соединения, чем частицы углерода, улучшая способность к разделению.
Используется хлорная кислота (PCA), поскольку она может эффективно извлекать NAD+ и NMN из биологических образцов, таких как плазма, с минимальными потерями.
Для корректировки матричных эффектов фиксированное количество (1 мкМ) каждого изотопного соединения добавляется в биологические образцы перед экстракцией PCA.
4. ПреимуществоsdimeLC-MS/MS
Двойные изотопные стандарты NMN, NMN (M+14) и NMN (M+5), в методологии, управляемой LC-MS/MS, позволяют точно проследить судьбу NMN при обработке проб, что значительно повышает точность и достоверность измерения NMN в биологических пробах. Кроме того, DIMELC-MS/MS может оценивать эффективность экстракции и абсолютные концентрации NMN в различных типах биологических образцов.
5. Заключение
Йестьновый ЖК-МС/МС-Методология с двойными изотопными стандартами NMN позволяет точно и надежно измерять NMN в биологических образцах.Он может быть использован для будущих исследований по приему NMN.
6. Справка
Унно, Джунья и др. "Абсолютное количественное определение никотинамидмононуклеотида в биологических образцах с помощью двойной изотоп-опосредованной жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии (dimeLC-MS/MS)." npj aging vol. 10,1 2. 2 января 2024 г., doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Почему стоит выбрать БОНТАК?
БОНТАК является лидером мирового НМН промышленность. У нас есть первая технология катализа цельных ферментов в Китае, и мы стали ведущим предприятием по производству коэнзимных продуктов, которые широко используются в индустрии здравоохранения, медицины и красоты, зеленом сельском хозяйстве, биомедицине и других областях. Примечательно, что BONTAC – это НМН поставщиком сырья знаменитой команды Дэвида Синклера в Гарвардском университете. Наши услуги и продукты заслуживают доверия. Кроме того БОНТАК имеет независимый исследовательский центр технологий коэнзимной инженерии на провинциальном уровне в Китае и собственные заводы, где может быть обеспечена чистота и стабильность продукции.
Отказ
Йесть Статья являетсяНа основе ссылка вАкадемический журнал. Соответствующая информация находится по адресу: обеспечивать Только в целях обмена информацией и обучения и не представляет собой каких-либо медицинских консультаций. Если есть какие-либо нарушения, пожалуйста, контактАвтор дляДелетион. Мнения, выраженные в настоящей статье, не отражают позицию БОНТАК.